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實驗方法原理基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的...

蛋白抗體是什么？蛋白抗體升高是什么原因引起的？專家們給我們做出了介紹：甲狀腺球蛋白（TG）是由甲狀腺濾泡上皮分泌，主要儲存在甲狀腺濾泡腔，是甲狀腺激素合成的場地。在正常情況下有很少量的甲狀腺球蛋白釋放入血，甲狀腺球蛋白正常值蛋白抗體（TGA）的存在。因為甲狀腺結(jié)合球蛋白可以影響血清甲狀腺球蛋白的測定。蛋白抗體是自身免疫性甲狀腺疾病病人血清中的一種常見自身抗體。它主要由IgG1、IgG2和IgG4組成，少部分為IgA和IgM。一般認(rèn)為TGAb對甲狀腺無損傷作用。TGAb與甲狀腺...

巴氏芽孢桿菌（Bacilluspasteurii）產(chǎn)脲酶，尿素酰胺水解酶,近來受到很多研究人員追捧,那如何培養(yǎng)這菌株成了很多大家關(guān)注的問題,下面就一一詳細(xì)介紹巴氏芽孢桿菌如何培養(yǎng)說明巴氏芽孢桿菌培養(yǎng)溫度:30℃培養(yǎng)時間:18-24小時培養(yǎng)基:.CASOAGAR+尿素（20克/升）酪蛋白胨15克大豆蛋白胨5克氯化鈉5克瓊脂20克蒸餾水1升PH7.3斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在2-8℃保存。凍干活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.1-0.2ml的培養(yǎng)液或者無菌水溶解，接種在2支斜面上...

在整個PCR體系中，引物占有十分重要的地位。PCR的特異性要求引物與靶DNA特異結(jié)合，不與其他非目的的DNA結(jié)合，PCR的靈敏性要求DNA聚合酶能與引物進(jìn)行有效的延伸，可見引物設(shè)計好壞與PCR結(jié)果密切相關(guān)。一、PCR引物設(shè)計原則1、引物長度一般在15-30bp引物長度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不應(yīng)大于38bp，因為過長會導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃，不適于TaqDNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng)；2、引物GC含量一般為40%-60%引物GC含量一般為40%-60%，以45...

流式結(jié)果圖有4種類型，分別為:1.直方圖2.散點圖3.等高線圖4.密度圖下面一一為大家介紹1.直方圖（Histograms）a.橫坐標(biāo)代表熒光信號或散射光信號相對強度，可以是線性或?qū)?shù)坐標(biāo)。b.縱坐標(biāo)一般是相對細(xì)胞數(shù)。直方圖適用于分析處理周期（如下圖）直方圖分析數(shù)據(jù)注意事項：①不能比較不同標(biāo)記之間的表達(dá)量。如一號樣本單標(biāo)記CD133、二號樣本單標(biāo)記CD44，那么CD133與CD44表達(dá)量不能用直方圖進(jìn)行比較。②直方圖的形狀（直方圖的高度及寬度）取決于儀器的類型、處理軟件和樣本...

ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。下面分析ELISA試劑盒操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法。目前用于紡織退漿的淀粉酶主要ELISA試劑盒，淀粉糖化酶（β-淀粉酶），胰淀粉酶，麥芽淀粉酶等。我國主要采用耐熱性強的枯草桿菌淀粉酶即α-淀粉酶（枯草桿菌），β淀...

一、實驗過程中需要注意的問題①蛋白樣品的提取及蛋白含量的檢測蛋白樣品的提取咱們*是按照試劑盒說明書來做的，步驟沒有什么講的，但是因為蛋白樣品的好壞直接決定了是否能做出來蛋白條帶，這就好比蓋房子所需要的磚頭一樣，一定要務(wù)必認(rèn)真。②儀器準(zhǔn)備清洗玻璃板：玻璃板的正確拿法應(yīng)該是拿住玻璃板的左右兩側(cè)不要用手拿上下兩端，避免手套上面的臟東西順著水流流到玻璃板上，玻璃板請一定務(wù)必清洗干凈，不干凈的玻璃板上面的殘留物可能會影響凝膠之間的化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致膠出現(xiàn)問題，對后面的結(jié)果影響很大。玻璃板放...

軟瓊脂(softagar)實驗一般用來檢測細(xì)胞的集落形成能力?，F(xiàn)在這種方法越來越多的用于分離癌細(xì)胞，也可以用來確認(rèn)癌細(xì)胞是否具有癌化特性，為進(jìn)一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎(chǔ)。該方法看似簡單，但如果細(xì)節(jié)掌握不好，往往導(dǎo)致實驗失敗或數(shù)據(jù)缺乏說服力。如果你曾經(jīng)在這個實驗上栽了跟頭，請不妨在如下幾個方面進(jìn)行嘗試：1.要確保在整個實驗過程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(tài)（80℃），尤其是在做基底時，如果瓊脂凝固過快會導(dǎo)致基底不均一；2.做瓊脂基底是應(yīng)避免產(chǎn)生小氣泡，一旦有小氣泡產(chǎn)生，應(yīng)...